１５３６ 重庆医学２００８年７月第３７卷第１４期 ・论 著・ ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９在大鼠肾缺血再灌注损伤早期的表达及意义 杜孝文▲，吴小候△，张守建▲，余晓东，李（重庆医科大学附属第一医院泌尿外科摘要：目的俊 ４０００１６） ４８ 探讨大鼠肾缺血再灌注后肾组织中ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９的表达及在肾缺血再灌注损伤中的作用机制。方法只健康雄性ＳＤ大鼠。分组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型，应用免疫组化二步法检测ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９表达的变化，测定肾组织 髓过氧化物酶（ＭＰ０）活性及血清肌酐（Ｓｃｒ）水平，以反映中性粒细胞浸润及肾功能损害的程度变化。结果ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９蛋 白在假手术组呈少量散在表达或不表达，缺血４５ｍｉｎ再灌注６ｈ有少量表达，再灌注１２、２４、７２ｈ呈阳性表达，以２４ｈ达高峰（Ｐ＜ ０．０５），多表达在皮质深层近曲小管及髓质区。与假手术组比较，缺血再灌注各组Ｓｃｒ水平和ＭＰＯ的活性升高，且随再灌注时间 延长而进一步升高，２４ｈ达高峰（Ｐ＜Ｏ．０１）。ＭＭＰ一２和ＭＭＰ－９蛋白的表达变化与Ｓｃｒ水平呈显著性正相关关系（ｒ分别为０．７６３ 和０．８７４，Ｐ＜０．０１）；与ＭＰＯ活性也呈显著性正相关关系（ｒ分别为０．７５２和０．６９３，Ｐ＜０．０１）。结论 肾缺血再灌注后肾组织中 ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９表达增加，提示ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９可能与早期肾缺血再灌注后损伤及加重有关。 关键词：局部缺血；肾；再灌注损伤；细胞外基质；基质金属蛋白酶 中图分类号：Ｒ３６５．６９２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７１－８３４８（２ＯＯ８）１４—１５３６—０３ Ｅａｒｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＭＭＰ－２ ａｎｄ ＭＭＰ－９ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｉｎ ｒｅｎａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉａｊｕｒｙ ＤＵ Ｘｉａｏ－ｗｅｎ ，ＷＵ Ｘｉａｏ－ｈｏｕ ，ＺＨＡＮＧ Ｓｈｏｕ—ｊｉａｎ ，ｅｔ ａ１． （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｕｒｏｌｏｇｙ，Ｆ ＂￡Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ。Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｎｅｃｅｓ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００１６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅａｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－２（ＭＭＰ一２）ａｎｄ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－９ （ＭＭＰ一９）ａｆｔｅｒ ｒｅｎａ１ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｍａｃｈｅｎｉｓｍ ｏｎ ｒｅｎａ１ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｒｅｎａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊ ｕｒｙ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｒａｔ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｗｏ—ｓｔｅｐ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｄｅｃｔ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９．Ｔｏ Ｍｅａｓｕｒｅ ｍｙｅｌｏｐｅｒｘｉｄｅ（ＭＰＯ）ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｂｌｏｏｄ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（Ｃｒ）ｌｅｖｅｌｓ ｆｏｒ ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｉｎｆｌｕｘ ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＭＭＰ一２ ａｎｄ ＭＭＰ一９ ｍａｉｎｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｄｅｅｐ ｌａｙｅｒ ｒｅｎａｌ ｐｒｏｘｉｍａｌ ｃｏｎｖｏｌｕｔｅｄ ｔｕｂｕｌｅｓ ａｎｄ ｍｅｄｕｌｌａｒｙ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ，ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ，ａｎｄ ｐｅａｋｅｄ ａｔ ２４ｈ ｏｆ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ／ｗｅａｋｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｈａｍ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（Ｃｒ）ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｙ— ｅｌｏｐｅｒｘｉｄｅ（ＭＰＯ）ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ｓｈａｍ，ａｎｄ ｐｅａｋｅｄ ａｔ ２４ｈ ｏｆ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ（Ｐ＜ ０．Ｏ１）．Ａｎｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＭＭＰ－２ ａｎｄ ＭＭＰ一９ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（ｒ＝０．７６３，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１；ｒ 一０．８７４，Ｐ＜Ｏ．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ），ａｎｄ ｔｈｅ ＭＰＯ ａｃｔｉｖｉｔｙ（ｒ一０．７５２，Ｐ＜Ｏ．０１；ｒ＝Ｏ．６９３，Ｐ＜Ｏ．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｉｎ－ ｃｒｅａｓｅ ｏｆ ＭＭＰ一２。ＭＭＰ一９ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ｍａｙ ｐｌａｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｅａｒｌｙ ｒｅｎａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｉｔｓ ｓｅｖｅｒｉｔｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｉｓｃｈｅｍｉａ；ｋｉｄｎｅｙ；ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉ￣ｕｒｙ；ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ；ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ 细胞外基质代谢失衡是引起肾缺血再灌注损伤的重要原 （Ｓｈａｍ）组２４只、缺血再灌注（ＩＲ）组２４只。各组又按时间点 不同，分为６、１２、２４、７２ｈ ４个亚组，每个亚组６只。 １．２．２手术方法所选大鼠用３ 的水合氯醛（１ＯｍＬ／ｋｇ）腹 腔注射麻醉，做腹部正中切口，切除右肾，分离左肾动脉，ｓｈａｍ 因之一，基质金属蛋白酶是降解细胞外基质的主要酶家族，而 基质金属蛋白酶的表达异常，将导致细胞外基质的代谢失衡。 ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９是基质金属蛋白酶家族中的主要成员，但它 们对肾缺血再灌注损伤影响的研究报道甚少。因此，本实验研 究肾缺血再灌注时ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９在肾组织中的表达情 况，并探讨它们在肾缺血再灌注损伤中的作用机制。 １材料与方法 组大鼠不夹闭左肾动脉；ＩＲ组用无创动脉夹夹闭左肾动脉 ４５ｍｉｎ后恢复灌流，恢复血流再灌注后６、１２、２４、７２ｈ取左肾， 同时经下腔静脉采血作肾功能检测。 １．３各项相关指标的检测 １．３．１ 肾组织形态学观察 取上述动物模型肾脏组织，１０ １．１实验动物及材料选用健康雄性ＳＤ大鼠４８只，体质量 ２２０～２６０ｇ，由重庆医科大学动物实验中心提供。小鼠抗 中性缓冲甲醛固定，脱水，石蜡包埋，切成４ｌ上ｍ厚的切片，ＨＥ 染色及免疫组化染色，光学显微镜下观察。 １．３．２实验大鼠血清肌酐水平的检测 各组动物在处死前 ＭＭＰ一２单克隆抗体（美国Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ公司，ＳＣ一１３５９５）；兔抗 ＭＭＰ－９多克隆抗体（武汉博士德生物工程公司，ＢＡ－０５７３）；即 用二步法ＰＶ检测试剂盒（北京中山生物技术有限公司）；髓过 经下腔静脉采血２ｍＬ，测血清肌酐浓度。 １．３．３肾组织ＭＰＯ活性的测定 取左侧肾脏皮髓质各 １００ｍｇ，配成５ 的组织匀浆，然后按照ＭＰＯ检测试剂盒说明 氧化物酶（ＭＰＯ）检测试剂盒（南京建成公司）。 １．２动物模型的建立 １．２．１ 实验动物的分组 ＳＤ大鼠随机分成两组：假手术 现在山东省莒县人民医院泌尿外科（２７６５００）。 通讯作者。 书进行操作，检测肾组织中ＭＰＯ的活性以间接反映中性粒细 维普资讯 http://www.cqvip.com
重庆医学２００８年７月第３７卷第１４期 １５３７ 表１ 大鼠血清肌酐水平及肾组织ＭＰＯ活性的变化（ ±ｓ） 与Ｓｈａｍ组比较， ；Ｐ＜０．０１；与Ｓｈａｍ组比较，＃；Ｐ＜０．０１。 表２ 肾组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９虽白表达强度变化的统计表Ｉ阳性面积百分比） 与Ｓｈａｍ组比较， ：Ｐ＜０．０５；与Ｓｈａｍ组比较，＃：Ｐ＜０．０５。 胞浸润的程度。 织损伤较重的区域ＭＭＰ一２和ＭＭＰ一９蛋白的表达明显增强， 说明它们与肾缺血再灌注后的组织损伤密切相关。ＭＭＰ一２和 ＭＭＰ－９蛋白的表达变化与Ｓｅｔ水平呈显著性正相关关系（ｒ分 １．４ 肾脏组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９蛋白水平的检测及半定量分 析取上述石蜡切片，常规二甲苯脱蜡，梯度酒精入水后，采用 免疫组化二步法检测大鼠肾脏组织中ＭＭＰ－２、ＭＭＰ一９蛋白表 达，ＤＡＢ染色，苏木精复染，脱水，透明，封片。以ＰＢＳ代替一 抗作为阴性对照。每张切片在１Ｏ×４Ｏ倍光镜下随机选择６个 视野，用ｌｍａｇ￣ｐｒｏ Ｐｌｕｓ４．５图像分析系统进行分析，测定每个 视野的阳性反应面积百分比（阳性反应面积／视野面积× 别为０．７６３和０．８７４，Ｐ＜０．０１）；与ＭＰＯ活性也呈显著性正相 关关系（ｒ分别为０．７５２和０．６９３，Ｐ＜０．０１）。 ３讨 论 肾缺血再灌注损伤是临床常见的病理生理变化，它主要表 现为肾小管坏死或凋亡，细胞外基质降解和问质中炎性细胞的 浸润［１］。细胞外基质与机体内细胞和组织的结构完整性有关， １００ ），用平均值表示阳性染色强度。 １．５统计学方法所有数据用ｉ±Ｓ表示，应用ＳＰＳｓ１１．５软 件进行统计学分析。统计方法采用单向方差分析和Ｐｅａｒｓｏｎ 相关性分析。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义，Ｐ＞０．０５为差异 无统计学意义。 ２结 果 在肾组织中细胞外基质为血管和肾小管提供支持结构，参与构 成基底膜。实验性大鼠缺血再灌注损伤发现缺血再灌注早期， 可使参与构成基底膜的细胞外基质成分减少『２ ］。 ＭＭＰｓ是一组降解细胞外基质成分的锌依赖性肽链内切 酶和蛋白水解酶，现已发现２３种ＭＭＰｓ，称为ＭＭＰ家族 ］。 该家族中的明胶酶Ａ（ＭＭＰ一２）和明胶酶Ｂ（ＭＭＰ一９）均能破坏 基底膜的主要成分Ⅳ型胶原蛋白¨５］。在许多对炎性反应性肾 脏疾病的研究中均发现ＭＭＰｓ表达上调，并与疾病的活动性 ２．１ 肾组织病理学改变 Ｓｈａｍ组形态学观察未见明显异常。 ＩＲ组近曲小管上皮细胞以水肿样变性、气球样变性为主，远曲 小管内可见管型，肾小管上皮有不同程度的坏死脱落，小管上 皮细胞基底膜断裂，刷状缘丢失，管腔内可见大量脱落坏死的 细胞，肾间质充血、水肿、炎细胞浸润，组织损伤以２４ｈ最重。 和炎性细胞的浸润有关¨５ ］。有学者在急性排斥反应动物模 型中发现，ＭＭＰ一９的上调同基底膜的破坏和炎性细胞的浸润 有关，并给予ＭＭＰ抑制剂ＢＢ－９４，起到了改善肾功能的作 用 。 ２．２大鼠肾缺血再灌注后各组Ｓｃｒ含量的变化 与Ｓｈａｍ组 大鼠相比较ＩＲ组大鼠Ｓｃｒ的水平明显升高（Ｐ＜０．０１），再灌注 ２４ｈ Ｓｃｒ含量最高，７２ｈ后已下降，见表１。 ２．３大鼠肾缺血再灌注后各组肾组织中ＭＰＯ活性的变化 与Ｓｈａｍ组比较，ＩＲ组随再灌注时间延长，肾组织ＭＰＯ活性 逐渐增强，２４ｈ达高峰，７２ｈ以后降低，见表１。 ２．４肾缺血再灌注后不同时相肾组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９蛋白 的表达ＭＭＰ一２和ＭＭＰ－９为胞质着色，呈棕黄色颗粒。ＩＲ 组ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９在再灌注后６ｈ即见表达上调，主要位于肾 本研究发现ＭＭＰ一２和ＭＭＰ一９在Ｓｈａｍ组不表达或低表 达，而在ＩＲ组大鼠肾组织中的表达自再灌注６ｈ出现，１２ｈ即 呈阳性表达，２４ｈ达高峰，两组比较差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５），阳性表达部位主要在皮质深层近曲小管上皮细胞、肾小 管周围的血管内皮细胞及间质细胞，这与国外报道基本一 致¨ｌ 。在再灌注２４ｈ阳性表达的肾小管上皮细胞出现坏死和 脱落，并且发生基底膜断裂，与间质水肿、充血，肾小管上皮细 胞排列疏松紊乱，炎性细胞浸润等病理变化及Ｓｃｒ水平的升高 小管上皮细胞，以皮质深层和外髓质区受损伤肾小管及肾小球 周边的近曲小管为著，表达量于再灌注后２４ｈ达高峰，以后下 降；而Ｓｈａｍ组肾组织仅有极微量表达 两组相比差异有统计 学意义（Ｐ＜Ｏ．０５），见表２。 具有显著相关性。说明ＭＭＰ－２和ＭＭＰ一９是肾缺血再灌注损 伤的“进展性因子”。 作者考虑肾缺血再灌注后，肾组织产生的ＭＭＰ一２和 ＭＭＰ一９可能通过对细胞外基质的降解，使基底膜的成分发生 改变和完整性遭到破坏，造成肾小管上皮细胞的损伤，甚至坏 ２．５ ＩＲ组ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９蛋白的表达变化与Ｓｃｒ、ＭＰＯ 的相关性分析对ＩＲ组各切片进行连续分析比较，发现在组 维普资讯 http://www.cqvip.com １５３８ 重庆医学２００８年７月第３７卷第１４期 死、脱落，导致肾小管阻塞和管腔内压力增高，从而引起少尿、 ］ ｎｅｐｈｒｉ］ ｔｉｓ［Ｊ］．Ｋｉ］ ｄｎｅｙ Ｉｎｔ］，１９９５， ４７：４８１．］ 肾小球率过滤降低；还可使原尿反流至肾问质中引起问质水 Ｅ６］Ｓｔｅｉｍａｎｎ－Ｎｉｇｇｌｉ Ｋ，Ｚｉｓｗｉｌｅｒ Ｒ，Ｋｕｎｇ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ 肿，从而压迫肾小管，加重肾小管的堵塞，如此便形成恶性循 ｏｆ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｎｔｉ－Ｔｈｙ１．１ ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｊ 环，加剧了肾缺血再灌注损伤。此外它们还可以通过降解细胞 Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ，１９９８，９（３）：３９７． 外基质和破坏内皮细胞之间的连接而使微血管的通透性增 ｒ７］ＭｃＭｉｌｌａｎ ＪＩ，Ｒｉｏｒｄａｎ ＪＷ，Ｃｏｕｓｅｒ ＷＧ，ｅｔ ａ１．Ｃｈａｒａｔｅｒｉｚａ— 高¨１ ］。微血管的通透性增高促进了炎性细胞向组织中的浸 ｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｇｌｏｍｅｒｕｌｌａｒ ｅｐｉｔｈｅｌｉａ ｃｅｌｌ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ａｓ 润机会；而且血浆从管腔中渗出还会引起血液浓缩和血流淤 ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－９ ｗｉｔｈ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ａ 滞，使肾组织血供进一步减少；此外渗出到问质中的血浆蛋白 ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ， 还严重影响了已损伤肾组织的修复，最终导致肾功能的恶 １９９６，９７（４）：１０９４． 化 。 ［８］Ｈａｇａｓｈｉ Ｋ，Ｈｏｎｉｋｏｓｈｉ Ｓ，Ｏｓａｄａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ－ｄｅ— 本实验运用免疫组化法研究肾缺血再灌注损伤后ＭＭＰ一２ ｒｉｖｅｄ ＭＴ－ＭＭＰ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ＭＭＰ一２ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉ— 和ＭＭＰ－９在肾组织中的表达情况，结果表明，ＭＭＰ一２和 ａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｄａｍａｇｅ ｉｎ ｃｒｅｓｃｅｎｔｉｃ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏ— ＭＭＰ一９是肾缺血再灌注损伤中的重要破坏性因子，但其具体 ｎｅｐｈｒｉｒｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｐａｔｈｏ，２０００，１９１；２９９． 激活的机制仍有待深入研究。减少ＭＭＰ一２和ＭＭＰ－９的含 ｒ９］Ｅｒｍｏｌｌｉ Ｍ，Ｓｅｈｕｍａｅｈｅｒ Ｍ，Ｌｏｄｓ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘ— 量、功能和活性，有望成为减轻肾缺血再灌注损伤的新途径 ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ－２／ＭＭＰ－９ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｂｅｎｅｆｉｔ ｏｆ ａｎ ＭＭＰ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｃｕｔｅ ｋｉｄｎｅｙ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｒｅ— 参考文献： ｊｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３，１１（２）：１３７． Ｈｕｍｅｓ ＨＤ，Ｌａｋｅ ＥＷ，Ｌｉｕ Ｓ．Ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌｅ ｅｅｌｌ ｒｅｐａｉｒ ｆｏｌ— ［１Ｏ］Ｂａｓｉｌｅ ＤＰ，Ｆｒｅｄｒｉｃｈ Ｋ，Ｗｅｉｈｒａｕｃｈ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ ｌｏｗｉｎｇ ａｃｕｔｅ ｒｅｎａｌ ｉｎｊ ｕｒｙ［Ｊ］．Ｍｉｎｅｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｙｔｅ Ｍｅｔａｂ， ａｎｄ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｉｓｃｈｅｍｉｃ １９９５，２１：３５３． ａｃｕｔｅ ｒｅｎａｌ ｆａｉｌｕｒｅ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｎａｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００４， Ｗａｌｋｅｒ ＰＤ．ＡＩｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌａｒ ｅｘｔｒａｃｅＵｕｌａｒ ｍａ— ２８６：Ｆ８９３． ｔｒｉｘ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ａｆｔｅｒ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊ ｕｒｙ ｔｏ ｔｈｅ ［１１］Ｓｕｔｔｏｎ ＴＡ，Ｋｅｌｌｙ，Ｍａｎｇ ＨＥ，ｅｔ ａ１．Ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ ｒｅｄｕｃｅｓ ｋｉｄｎｅｙ［Ｊ］．Ｌａｂ Ｉｎｖｅｓｔ，１９９４，７０：３３９． ｒｅｎａｌ ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ ｌｅａｋａｇｅ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｒｅ— Ｊａｉｎ Ｓ，Ｂｉｃｋｎｅｌｌ ＧＲ，Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ ＭＩ ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｎａｌ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｎａｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００５，２８８（１）： ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｔｕｒｎｏｖｅｒ ａｆｔｅｒ ｒｅｎａｌ ｉｓｃｈａｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒ— Ｆ９１． ｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｂｒ Ｊ Ｓｕｒｇ，２０００，８７：１１８８． ［１２］Ｗｕ ＷＢ，Ｈｕａｎｇ ＴＦ．Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ一２，ｃｌｅａｖａｇｅ ｏｆ Ｂａｒｏｒ Ａ，Ｎｕｔｔａｌｌ ＲＫ，Ｄｕｄｄｙ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ａｌｌ ｍａ— ｍａｔｒｉｘ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄ ａｄｈｅｒｅｎｓ ｊ ｕｃｔｉｏｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ａ ｓｎａｋｅ ｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｍｅｍｂｅｒｓ ｉｎ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ ｅｍｐｈａｓｉｚｅ ｖｅｎｏｍ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏ— ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ａｓ ｍａｊｏｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｉｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ，２００３，２８８：１４３． ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｂｒａｉｎ，２００３，１２６：２７３８． Ｎａｋａｍｕｒａ Ｔ，Ｅｂｉｈａｒａ Ｉ，Ｔｏｍｉｎｏ Ｙ，ｅｔ ａｌ，Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａ ｓｐｅ— （收稿日期：２００８—０３—０５） ｃｉｆｉｃ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ Ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ｏｎ ｍｕｒｉｎｅ ｌｕｐｕｓ （上接第１５３５页） ［２］ 谢桐，凌桂明．乳糜尿发病的主要原因是淋巴系动力学改 沟或血管钳应远离肾动、静脉，生殖血管，输尿管，防止其损伤。 变［Ｊ］．中华泌尿外科杂志，１９８４，５：２５７． （７）术中注意保护肾上腺静脉和生殖血管。（８）肾下极的脂肪 ［３］ Ｃｈｉｕ ＡＷ，Ｃｈｅｎ ＭＴ，Ｃｈａｎｇ ＬＳ．Ｌａｐａｒｏｓｃｏｐｉｃ ｎｅｐｈｒｏｌｙｓｉｓ 囊不完全分开，让其形成－－４＇兜，以防止术后肾下垂。（９）术后 ｆｏｒ ｃｈｙｌｕｒｉａ ｃａｓｅ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｌｏｎｇｔｅｍ ｓｕｃｃｅｓｓ［Ｊ］．Ｊ Ｅｅｄｏｕ— 患者应绝对卧床３ｄ，防止术后肾下垂。（１０）腹膜后腔镜肾蒂 ｒｏｌ，１９９５，９：３１９． 淋巴管结扎术可以完全取代开放肾蒂淋巴管结扎术。 ［４］ Ｈｅｍａｌ ＡＫ，Ｋｕｍａｒ Ｍ，Ｗａｄｈｗａ ＳＮ．Ｒｅｔｒｏｐｅ ｒｉｔｏｎｅｏｓｃｏｐｉｃ 通过对该组病例的随访分析，作者认为腹膜后腔镜肾蒂淋 ｎｅｐｈｒｏｌｙｍｐｈｏｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｕｒｅｔｅｒｏｌｙｓｉｓ ｆｏｒ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎ— 巴管结扎术治疗乳糜尿，达到了传统开放手术的效果，与其相 ｔｒａｃｔａｂｌｅ ｆｉｌａｒｉａｌ ｃｈｙｌｕｒｉａ［Ｊ］．Ｊ Ｅｎｄｏｕｒｏｌ，１９９９，１３：５０７． 比，具有手术时间短，创伤小，淋巴管结扎精细、彻底，术中出血 ［５］ 张旭，叶章群，陈志强，等．后腹腔镜肾蒂淋巴管结扎术治 量较少，术后并发症少，肠功能恢复快，住院时间短，恢复正常 疗乳糜尿（附６例报告）［Ｊ］．中华泌尿外科杂志，２００３，２４ 劳动力快，疗效肯定等优点，可完全替代开放手术，成为目前治 （２）：９０． 疗乳糜尿较理想的方法。 ［６３ 江军，朱方强，靳风烁，等．后腹腔镜肾蒂淋巴管结扎术治 参考文献： 疗乳糜尿的经验［Ｊ］．第三军医大学学报，２００３，２５：２２２６． ［１］吴阶平主编．吴阶平泌尿外科学［Ｍ］．济南：山东科学技 （收稿日期：２００８－０３—０５） 术出版社，２００４：６３４．
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