一、实验目的
1．了解有关食品样品预处理方法。
2．掌握食品样品中钙、镁、铁的测定及样品中干扰的排除方法。 3．掌握分光光度计使用方法。
4．运用所学过的知识设计有关食品样品中钙、镁、铁综合测试方案，提高分析问题和解决问题的能力。
二、实验原理
大豆等干样品经粉碎(蔬菜等湿样品需烘干)、灰化、灼烧、酸提取后，可采用配位滴定法，在碱性（pH =12）条件下，以钙指示剂指示终点，以EDTA为滴定剂，滴定至溶液由紫红色变蓝色，计算试样中钙含量。另取一份试液，用氨-氯化铵缓冲溶液控制溶液pH =10，以铬黑T为指示剂，用EDTA滴定至溶液由紫红色变蓝色为终点，与钙含量差减得镁含量。试样中铁等干扰可用适量的三乙醇胺掩蔽消除。可用邻二氮菲分光光度法测定铁的含量。
三、主要仪器与试剂 1．仪器
分析天平，烘箱，蒸发皿，粉碎机，高温炉，瓷坩埚，容量瓶（250 mL），移液管，锥形瓶（250 mL），烧杯（250 mL和100 mL），滴定管，吸量管，比色管（50 mL），比色皿（1 cm），分光光度计。
2．试剂
0.005 mol·L−1 EDTA溶液，20% NaOH，pH =10 氨性缓冲溶液，1﹕3三乙醇胺，1﹕1 HCl，
－1
钙指示剂（配成1﹕100氯化钠固体粉末），1 g·L 铬黑T指示剂（称取0.1 g铬黑T溶于75
－
mL三乙醇胺和25 mL乙醇中），基准CaCO3，100 μg·mL1铁标准溶液，0.15 %邻二氮菲，
－
10%盐酸羟胺，1 mol·L1 NaAc溶液。
四、实验步骤
安全预防：盐酸、氢氧化钠具有腐蚀性，避免直接接触；乙醇易燃，避免明火；高温炉在使用中注意避免被灼伤。
1．试样制备
将蔬菜、豆类、海产品、菌类等食品（任意选择一种试样）洗净、晾干。适量称取可食用部分，放入烘箱于110 ℃温度下烘干后置于蒸发皿中(豆类用粉碎机粉碎后适量称取，其他干样品可直接称取)，在电炉上灰化、炭化完全，置于高温炉中650 ℃灼烧2 h。取出冷却后，加入10 mL 1﹕1 HCl溶液浸泡20 min，不断搅拌，静止沉降，过滤，用250 mL容量瓶承接，用蒸馏水洗沉淀、蒸发皿数次。定容、摇匀，待用。
2．EDTA溶液的标定
用差减法准确称取0.10～0.12 g基准物质CaCO3于小烧杯中，少量水润湿，盖上表面皿，从烧杯嘴处往烧杯中滴加5 mL 1﹕1 HCl溶液，使CaCO3完全溶解。加水50 mL，微沸2～3分钟以除去CO2。冷却后用水冲洗烧杯内壁和表面皿。定量转移至250 mL 容量瓶中。定容，摇匀。
用移液管移取钙标准溶液20.00 mL于锥形瓶中，加水至100 mL，加5～6 mL 20% NaOH溶液，加钙指示剂，用EDTA标准溶液滴定至溶液由红色变为蓝色即为终点，平行实验做3次，计算EDTA标准溶液的浓度。
3．试样中钙、镁含量测定
试样中钙、镁合量的测定：用移液管移取上述制备液20.00 mL于锥形瓶中，加5 mL 1﹕3三乙醇胺，加水至100 mL，加15 mL pH = 10氨性缓冲溶液，4～5滴铬黑T指示剂，用EDTA标准溶液滴定至溶液由紫红色变蓝色为终点。
试样中钙含量的测定：用移液管移取上述制备液20.00 mL于锥形瓶中，加5 mL 1﹕3三乙醇胺，加水至100 mL，加20% NaOH溶液5～6 mL，加钙指示剂，用EDTA标准溶液滴定至溶液由红色变蓝色为终点，平行实验做3次。
钙镁合量减钙含量可得镁含量。
4．邻二氮菲分光光度法测定试样中铁含量
标准曲线的制作：在6个50 mL比色管中，用吸量管分别加入0.00，0.20，0.40，0.60，
－
分别加入1.0 mL盐酸羟胺，2.0 mL邻二氮菲，5.0 mL 0.80，1.00 mL 100 μg·mL1铁标准溶液，
NaAc溶液。每加入一种试剂都要摇匀，用水稀释到刻度，放置10 min。用1 cm比色皿，以试剂空白为参比，于508 nm处，测量各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制工作曲线。
试样中铁含量的测定：准确移取适量试样制备液于比色管中，以下按标准曲线操作步骤显色、测定其吸光度值，在工作曲线上查出试样中铁的含量。
五、思考题
1．如何判断样品已灼烧完全？如何判断加1﹕1 HCl提取样品时钙、镁、铁已提取完全，提取完成后留下的物质是什么？
2．请写出有关的成分结果含量计算公式。
参考文献
[1] 王英华，徐家宁，张寒琦，等. 推荐一类贴近生活的基础分析化学综合实验[J]. 大学化学，2006，21(5)：45-46
[2] 杨昌举. 食品科学概论[M]. 北京：中国人民大学出版社，1999 [3] 武汉大学. 分析化学实验(第四版)[M]. 北京：高等教育出版社，2001
（霍冀川 邓跃全）
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