IMViC试验是什么,由哪几个试验
发布网友
发布时间：2022-04-23 22:31
共4个回答
热心网友
时间：2023-09-16 05:09
IMViC试验是数个试验的集合。在微生物实验室中，时常用来鉴定大肠菌群（Coliform bacteria）。
一、吲哚试验
在本试验中，我们将欲鉴定的微生物放到蛋白胨液态培养基（peptone water broth）中。该培养基含有色胺酸（tryptophan），可被色胺酸酶转变成吲哚，氨和丙酮酸。
接着吲哚可以用二甲苯萃取出来。欲测试液态培养基中是否有吲哚产生，在培养细菌24小时后，我们加入柯瓦克试剂（Kovac' reagent），若在液体表面出现一层（粉）红色，这是阳性结果，表示有吲哚存在。
二、甲基红
甲基红（MR）试验
检测细菌能 否分解葡萄糖产生有机酸的能力。当细菌代谢糖产生有机酸时，使加入培养基中的甲基红指示剂由橘*(pH 6.3)变为红色(pH4.2)，即甲基红反应。
例如，大肠杆菌先发酵葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸再被分解为有机酸(甲酸、乙酸、乳酸琥珀酸等)，由于产酸量较多，使培养基的pH降至4.2以下，此时加入甲基红指示剂呈红色，为阳性反应;而产气肠杆菌分解葡萄糖产生有机酸量少；
或产生的有机酸又进一步转化为非酸性末端产物(如醇、醛、酮、气体和水等) ,使pH升至大约6.0，此时加入甲基红指示剂呈*，为阴性反应。
某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解成为甲酸、乙酸、琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下，加入甲基红指示剂可呈红色。
如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在5.4以上，加入甲基红指示剂呈橘*。本试验常与V-P试验一起使用，因为前者呈阳性的细菌，后者通常为阴性。
三、V-P试验
用于检测细菌能否利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力。某些细菌，如产气肠杆菌分解葡萄糖产生的丙酮酸又进行缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇(3 -羟基丁酮) ,此化合物在碱性条件下易被空气中的氧气氧化成二乙酰(丁二酮)，二乙酰与培养基蛋白胨中精氨酸的胍基作用；
生成红色化合物，即V - P试验阳性反应;而大肠杆菌不产生红色化合物，为阴性反应。若在培养基中加人α-紫酚或少量肌酸(0.3%)、肌酐等含胍基的化合物，可加速此反应。
四、柠檬酸盐利用试验
本测试使用西蒙柠檬酸琼脂（Simmon's citrate agar），检测该微生物可否只用柠檬酸盐作为其唯一碳源。该琼脂含有柠檬酸盐、胺盐（作为氮源）和溴麝香草酚蓝（bromothymol blue）作为指示剂。在种菌以前，西蒙柠檬酸琼脂是绿色的；若柠檬酸盐被利用了（阳性），将转为蓝色。
扩展资料：
大肠菌群是革兰氏阴性菌，是好氧或兼性厌氧杆菌，会发酵乳糖并在48小时内产生气体。食物中若存在一些大肠菌群表示该食物受到粪便污染。
"IMViC"中每一个英文字母各代表了一种试验。"I"代表吲哚（indole）试验；"M"代表甲基红（methyl red）试验；"V"代表伏普（Voges Proskauer）试验；
"C"代表柠檬酸盐利用（citrate utilization）试验。小写字母"i"只是代表in：柠檬酸盐利用试验中我们会把大肠菌群放到柠檬酸盐中（place "in Citrate"）。
这些试验方便我们鉴定肠杆菌科（Enterobacteriaceae）。
热心网友
时间：2023-09-16 05:09
I→吲哚试验
原理
某些细菌有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚（靛基质），吲哚能与对二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈红色。
实验方法
试剂盒法：将对二甲基氨基苯甲醛加入细菌蛋白胨水培养液中。（注：不能摇晃试剂盒）
试管法：以接种环将待检菌新鲜斜面培养物接种于Dunham氏蛋白胨水溶液中，置37℃培养24~48h（可延长4~5d）；于培养液中加入戊醇或二甲苯2~3mL，摇匀，静置片刻后，沿试管壁加入Ehrlich氏或Kovac氏试剂2mL。
斑点试验法：将一片滤纸放在培养皿的盖子上或一张载玻片上，滴加1~1.5mL试剂液于滤纸上使其变湿，取18~24h琼脂平板培养物涂布于浸湿的滤纸上，在1~3min内观察。
试验结果
试剂盒法：呈红色反应，形成玫瑰吲哚，为吲哚试验阳性。不出现红色则为阴性。
试管法：出现红色颜色变化为阳性。不出现红色则为阴性。
斑点试验法：棕色的试剂由紫红变为红色者即为阳性。
M→甲基红（MR）试验
原理
某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解成为甲酸、乙酸、琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下，加入甲基红指示剂可呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在5.4以上，加入甲基红指示剂呈橘*。本试验常与V-P试验一起使用，因为前者呈阳性的细菌，后者通常为阴性。
试验方法
取一种细菌的24h培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置37℃培养48~72h，取出后加甲基红试剂（甲基红0.02g，95%酒精60mL，蒸馏水40mL）3~5滴，立即观察结果。如果培养液呈红色者为阳性，橙色者为可疑，*者为阴性。
试验结果
培养液呈红色者为阳性，橙色者为可疑，*者为阴性。
V→二乙酰（V-P）试验
原理
某些细菌能发生如下转换：葡萄糖→丙酮酸（脱羧）→乙酰甲基甲醇（Acetymethyl carbinol）→2，3—丁烯二醇（2,3—bytaylene cylycol），在有碱存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。本试验目的在于测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。大肠埃希菌与产气肠杆菌均能分解葡萄糖，产酸产气，为区分两菌可采用V-P试验及甲基红试验。
试验方法
O’Meara’s法：将被检细菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基后，于35~37℃培养48h，于每毫升培养物中加入0.1mL试剂（40g KOH溶于100mL蒸馏水中，加入0.3g肌酐即成），猛烈摇振混合。
Baritt’法：同上法接种培养细菌，于2mL培养液内加入甲液（6%α-萘酚酒精溶液）1mL和乙液（40% KOH）0.4mL，摇振混合。
试验结果
试验时强阳性者约于5min后，可产生粉红色反应。如长时间无反应，置室温过夜，次日不变者为阴性。
C→枸橼酸盐利用试验
原理
当细菌利用铵盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源时，若细菌能利用这些盐作为氮源和碳源而生长，则能利用枸橼酸钠产生碳酸盐，从而与利用铵盐产生的氨反应，形成NH4OH，使培养基呈碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝。
试验方法
Simmons氏培养基法：将被检细菌少量接种到培养基中，37℃培养2~4d，观察培养基颜色变化。
Christenten氏培养基法：将被检细菌少量接种到培养基中，接种时先划线后穿刺，孵育于37℃观察7d，观察培养基颜色变化。
实验结果
Simmons氏培养基法：培养基变蓝色，阳性；不变，阴性。
Christenten氏培养基法：培养基变红色，阳性；不变（*），阴性。
参考资料：http://ke.baidu.com/link?url=0NwHdFppCPtVYBKMs1_1_wYIy0WfVdXtpIqaNFMt4hZdcU7dasUxg_Lere34oQWmhovH7idJlkvD81DARjUmka
热心网友
时间：2023-09-16 05:10
IMViC试验 用于鉴别细菌种类，吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）、枸橼酸盐利用（C）四种试验合称IMViC试验
热心网友
时间：2023-09-16 05:10
乳糖胆盐用九管发酵法：1、初发酵：选择三个稀释梯度，每个稀释度各注三管结果产酸产气的进行复发酵试验：方法雷同，用乳糖胆盐复发酵培养基。复发酵
