HPLC法中，等度与梯度洗脱有什么区别？两者分别适合怎样组分的分离？
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1、洗脱的改变与不改变的配比不同
等度洗脱：流动相的组成比例和流速恒定不变。梯度洗脱：改变流动相的浓度配比。
2、它们的定义不同
等度洗脱定义：液相色谱操作中，等度洗脱即在样品组分的分析周期中，流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。
梯度洗脱定义：梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。
扩展资料：
用梯度洗脱还是等度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度洗脱和等度洗脱两种条件时，梯度洗脱的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度洗脱）。
1、杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下冲两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑用梯度）。
2、杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）
3、还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。
在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，用梯度要麻烦一些。
洗脱要求：
1、洗脱液体积应足够大，一般要几十倍于床体积，从而使分离的各峰不致于太拥挤。
2、梯度的上限要足够高，使紧密吸附的物质能被洗脱下来。
3、梯度不要上升太快，要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸，会引起区带扩散；而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。
梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。
(1)、低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀，在常压下预先按一定的程序将溶剂混
合后，再用泵输入色谱柱系统，也称为泵前混合。
(2)、高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控
制)、混合器等部件所组成。两台(或多台)泵分别将两种(或多种)极性不同的溶剂输入混合
器，经充分混合后进入色谱柱系统。
参考资料来源：百度百科-等度洗脱
参考资料来源：百度百科-梯度洗脱
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梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程序不断改变流动相的浓度配比
等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。
用不用梯度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时，梯度的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度）。
（1）杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑等度）。
（2）杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）
（3）还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。
在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，毕竟用梯度要麻烦一些。
希望对你有帮助。
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等度：流动相比例相同，换句话，在一次分析过程中使用一种流动相。
梯度：流动相比例、成分都可不相同
同时检测多种成分，各种成分可以使用不同比例的流动相，使用目的可以使样品目标成分分离效果更好，或缩短分析检测时间等。如农残检测
